緩沖溶液作為重要的實(shí)驗(yàn)溶液，經(jīng)常會(huì)在各大生物實(shí)驗(yàn)操作中出現(xiàn)，其主要作用就是對(duì)反應(yīng)體系的PH值有平衡作用，作為受青睞的溶液之一，在實(shí)驗(yàn)中選擇使用時(shí)也有很多條件限制。所以接下來(lái)，就具體給大家談一談實(shí)驗(yàn)中使用緩沖液的選擇要求。

一、生物緩沖劑pH值的選擇

實(shí)驗(yàn)中的緩沖范圍必須要符合反應(yīng)體系的pH值才能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性以及避免操作過(guò)程中出現(xiàn)干擾性，緩沖范圍的pH值通常取決于電離解數(shù)pKa值，但是pKa值又和鹽或酸濃度有關(guān)，所以常根據(jù)公式來(lái)進(jìn)行計(jì)算。理論上緩沖范圍PH值在9.4-11.7之間，但在實(shí)際的實(shí)驗(yàn)中為了保證準(zhǔn)確度，通常會(huì)采用pH值在9.7-11.7之間的緩沖液，例如：CAPS緩沖液。有時(shí)可能也會(huì)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模褂闷渌秶膒H值，但都需要進(jìn)行選擇，不能完全使用同一種范圍的pH。

二、電離平衡常數(shù)及緩沖范圍要求

有很多測(cè)定實(shí)驗(yàn)中會(huì)要求反應(yīng)溶液的PH值穩(wěn)定在一定的范圍內(nèi)，以保證實(shí)驗(yàn)進(jìn)程不發(fā)生變化，通過(guò)加入一定量的緩沖液，達(dá)到中和，使得緩沖范圍控制在所需要的范圍內(nèi)。另外，有時(shí)在采用電位滴定法測(cè)定時(shí)，需要不同配比且是同一種緩沖液的滴定曲線(xiàn)，這時(shí)對(duì)于電離平衡常數(shù)也有要求，需要特別注意。

三、生物緩沖劑的使用限制條件

通常情況下，緩沖范圍合理，符合反應(yīng)體系，就需考慮反應(yīng)體系的限制性條件，例如：PBS緩沖液會(huì)絡(luò)合金屬離子鈣，酶等，而有些反應(yīng)體系中酶或蛋白質(zhì)活性卻受到金屬離子的影響，這時(shí)就不能使用此種緩沖液。另外，還有一些其它類(lèi)型的緩沖液也是需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)測(cè)定目的來(lái)使用，并非使用一種緩沖液適用于所有的生物實(shí)驗(yàn)。

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